冷冻干燥保藏转接技术
建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。
1、安瓶管开封
用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。
用火焰将安瓿管顶端加热。
滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。
用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。
2、菌株恢复培养
用无菌吸管,吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻振荡,使冻于菌体溶解呈悬浮状
取0.1-0.2ml菌体悬浮液,移植于适宜的琼脂斜面/平板培养基上,剩余的菌液,注入适宜的液体培养基内,然后在建议的温度下培养。
3、注意事项
菌种活化前,请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。
厌氧菌的培养,如无特别说明,自开封至接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态。
某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二重复 一次。
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