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		黄曲霉毒素m1污染主要存在于生活中m1的检测方法

　　黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米等食物中；在水中的溶解范围为10毫克/升~20毫克/升，可大量溶解于氯仿、甲醇、二甲基亚砜等中等极性的有机溶剂中，不溶于己烷、石油醚和乙醚；易被碱或强氧化剂破坏；进入人体后主要经消化道吸收，大部分分布在肝脏、肾脏，少部分分布在血液、肌肉、脂肪组织中，其在体内的代谢过程主要为羟基化作用、去甲基作用和环氧化作用。（“只要发霉，就会有黄曲霉毒素。”知名食品安全专家董金狮告诉《羊城晚报》记者，黄曲霉是一种常见霉菌，广泛存在于自然界，潮湿易发霉的植物和食品中都会存在。）黄曲霉毒素检测方法

　　其实黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。它是20世纪60年代初发现的一种真菌的有毒代谢产物,由曲霉属中的黄曲霉和寄生曲霉所产生。1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,它的毒性极强，对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。近年来,AFB1污染事件的发生,已引起世界各国及消费者对食品安全的关注[1-3]。世界各国对黄曲霉毒素的检出标准都做了严格的规定。1995年,世界卫生组织制定的食品黄曲霉毒素最高允许浓度为15ug/kg.?因此,对AFT的检测不仅关系到动物的安全,更直接影响到人们的身体健康和生命安全。中药对照品

　　而黄曲霉毒素M1属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。物理化学性质相当稳定，不被巴氏消毒法破坏。哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食品后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。黄曲霉毒素M1危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。化学对照品

　　黄曲霉毒素M1的检测方法本法系用高效液相色谱法（附录 VI D）测定药材及制剂中的黄曲霉毒素（以黄曲霉毒素 B1、B2、G1 和 G2 总量计），除另有规定外，按下列方法测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40:18:42）为流动相，■流速每分钟 0.8ml■【删除】；采用柱后衍生法检测，（1）碘衍生法：衍生溶液为 0.05%的碘溶液（取碘 0.5g，加入甲醇 100ml 使溶用水稀释至 1000ml 制成），衍生化泵流速每分钟 0.3ml，衍生化温度 70℃；■（2）光化学衍生法：光化学衍生器（254nm）■ ；以荧光检测器检测，激发波长 λex =360nm(或【增订】 365nm)，发射波长 λem =450nm。两个相邻色谱峰的分离度应大于 1.5。混合对照品溶液的制备精密量取黄曲霉毒素混合标准品（黄曲霉毒素 B1、 2、 B G1、G2 标示浓度分别为 1. 0?0?8g/ml、0.3?0?8g/ml、1.0?0?8g/ml、 0.3?0?8g/ml、）0.5ml，置 10ml 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液 1ml，置 25ml 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。供试品溶液的制备取供试品粉末约 15g(过二号筛)，精密称定，加入氯化钠 3g，置于均质瓶中，精密加入 70%甲醇溶液 75ml，高速搅拌 2 分钟（搅拌速度大于 11，转/分）离心 5 分钟 000 ，（离心速度 2500 转/分）精密量取上清液 15ml， 50ml ，置量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45?0?8m）滤过，量取续滤液 20.0ml，通过免疫亲合柱■（AflaTest@P）■【删除】，流速每分钟 3ml，用水 20ml 洗脱，洗脱液弃去,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置 2ml 量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取上述混合对照品溶液 5?0?8l、10?0?8l、15?0?8l、20?0?8l、25?0?8l，注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。另精密吸取上述供试品溶液 20～25?0?8l，注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 的量，计算，即得。【附注】（1）本实验应有相应的安全、防护措施，并不得污染环境。（2）残留有黄曲霉毒素的废液或废玻璃器皿，应置于专用贮存容器（装有 10%次氯酸钠溶液）内，浸泡 24 小时以上，再用清水将玻璃器皿冲洗干净。相关阅读：黄曲霉毒素致突变性、致癌和致畸性　

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