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| 尔特原理的细胞体积的监视功能和研究应用 | |||
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这个库尔特原理提供了一种方法用于计算和施胶细胞,和适当的应用导致IVDs进展。 这个原理可以应用于每个阶段的测试开发,从基本的细胞生物学研究,通过临床前生理测试,并最终在常规临床诊断。 在更好的理解库尔特原理及其贡献,试管的制造商可能会找到新的方法,将这一方法应用于自己的试管测试。
在本文中,库尔特原理是首先描述条理。 第二,最近的发现支持的库尔特原理和相关测试开发突出显示试管。 最后,当代仪器提出了关于这个问题。 这篇文章应该给一个更好的理解和欣赏方式,库尔特原理可以用来开发新的试管测试。
库尔特原理的这个库尔特原理依赖于事实对象放置在电场将修改当前流在那个领域。 为了把这个观察到一个有用的工具,华莱士·h·库尔特确认,必须满足几个条件。 首先,应该建立电场在导电液体。 第二,当前的路径应该是身体上的限制,存在颗粒或细胞在野外将导致当前的变化探测方式。 此外,颗粒分散在液体中必须和稀释足以让一次只有一个粒子进入检测区域。
图1。 简化的示意图一库尔特计数器。 随着真空把悬架通过孔径在,电流电极之间流动。 作为单独的粒子穿过敏感区域(点1 - 8)在B、电压脉冲生成C和D所示的大细胞在C创建一个更大的振幅脉冲比小细胞在D,因为它会导致更大的电阻通过孔径。 这个搅拌器有助于使颗粒悬浮,液体从储层可以用来清除孔管之间运行。
通常情况下,粒子有导电性不同液体的。 在大多数的实现、悬浮粒子被迫通过收缩同时电流当电流测量。 作为单个粒子通过缢痕,离散电阻脉冲生成,具体幅度是成正比的粒子的体积。 这个过程如图1所示,它显示了一个假想的对比产生的电压峰值大、小细胞。 因此,该方法可以准确的数量和体积测量允许用相对较少的限制。
库尔特原理是足够灵活的应用在许多不同的方式与宿主细胞,颗粒,和设备。 由于这种灵活性,原则是用来描述从墨水,碳粉subvisible蛋白质聚合。 这种多功能性IVDs也是很重要的,因为它提供了调查人员重要的选项,当他们设计实验。 什么是重要的,其余的这一讨论能够极大地改变液体性质和精确测量体积随时间变化而变化。 这些功能是特别有用的在发展的早期阶段试管中,基本的生物学研究应用库尔特原理来研究细胞功能。
(总结以上描述提供了一个通用的库尔特原理。 一个更详细的描述可能会发现在库尔特1953年的专利或他的文章在《国家电子会议。 1、2 另一个的信息来源是一个历史叙述的发现发表50周年纪念Coulter的专利。 3 )
理解细胞内稳态
一个重要的步骤在开发一个好的商业试管试验是一个彻底的了解疾病的机制影响正常的细胞过程。 其中一个最重要的过程是维护细胞体积。 而细胞体积的变化发生在一个正常的细胞周期的一部分,他们也可以表明一个障碍。 自库尔特原理允许调查人员研究这些体积变化在同一时间尺度发生,它经常被用于此类调查。 这些研究往往集中在细胞外和细胞内的特征因素都导致细胞体积的变化。 4
在健康的个体,细胞外的溶质浓度在定义良好的边界通常会波动。 然而,在一些疾病,波动变得极端。 例如,在镰状细胞性贫血,过于活跃的离子通道,外部条件刺激缺氧导致严重的血红细胞收缩。 5 这最初的收缩导致聚合的一种异常血红蛋白(HbS)和叶细胞和其特点镰刀形状。 通过细胞体积和计数测量,库尔特原理可以帮助找出存在的镰状细胞贫血。
同样,它可以用来研究疾病机制的许多细胞外因素所致。 使用库尔特原理实现在库尔特计数器,细胞外的溶质的影响可以由不同成分的研究和分析数据收集悬浮液在一系列作品。 一些研究人员就利用这种方法来监控产生的变化在细胞体积作为时间的函数。 6
细胞内的因素也导致细胞体积的变化。 一个著名的例子是肿胀的细胞有丝分裂开始。 作为细胞进展通过中期,后期,末期,他们必须不断调整内部溶质浓度维持平衡和他们的环境。 用库尔特计数器生成的数据已经被用来表明细胞内离子浓度的变化可以刺激细胞提前从中期到后期。 7 同样,库尔特原理有助于证明体积变化在细胞凋亡是由细胞内因素。 8 其他几个研究利用类似的方法来研究其他细胞的功能。 9
图2。 体积变化的概念使用钾监管作为一种模式溶质。 在一个,细胞内和细胞外的钾浓度是正常的,和细胞在体内平衡。 在B细胞外钾水平的增加,导致监管体积减少。 在C语言中,细胞内钾水平的增加,导致监管体积增加。 在这两个B和C,监管体积变化涉及细胞的细胞骨架蛋白、离子泵,和其他调节蛋白,它必须在一个协调的方式行动。
这样的体积调节过程如图2所示。 监管体积变化涉及蛋白质的协同动作压力传感器、离子泵、细胞骨架重排,以及各种其他行动旨在维持平衡。 这个库尔特原理,结合其他技术,已经被用来描述这种监管体积变化。 例子包括研究细胞骨架重排,细胞内的信号级联的活动,活动的离子通道。
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