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| 改进的敏感性和特异性抗原表位的识别和增强 | |||
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鼠标单克隆抗体已经主导工具在研究和诊断和治疗领域。 然而,一项新技术,以生成兔单克隆抗体提供了一种改进的替代为科学界和新颖的诊断和治疗的机会。 这种新技术的优点是多方面的:高亲和力,提高特异性、识别抗原和抗原,是nonimmunogenic到啮齿动物。 而免疫分析法是最受欢迎的分析技术应用于临床和临床前诊断,仍有差距的开发商和制造商抗体试管。 这是因为,在一定程度上,缺乏高质量的抗体在免疫测定和增加的需求为更好或小说抗体随着基因组学、蛋白质组学的出现,epitomics。 抗体性能相关的敏感性,特异性,线性动态范围、基体效应、免疫测定标准化集的基本决定因素的质量试管医疗设备。 本文讨论的一些特点兔免疫系统,导致更好的抗体生成、评论兔单克隆抗体技术,并将其应用在诊断领域和潜力。
一个更好的免疫系统
虽然兔子是众所周知的,安装一个强烈的免疫反应对外国抗原和兔多克隆抗体是最古老和最广泛使用的研究工具在免疫学,为什么兔子一般产生更好的抗体抗原许多比啮齿动物仍未被完全弄清楚。 最近的研究进展在兔免疫学有进一步了解这个问题:在初级和随后的免疫接种,天真的B细胞分化成刺激抗体分泌等离子或记忆细胞。 t细胞抗原MHC类提供的我和II类分子通常肽,而模CD1分子MHC分子,家庭,现在的nonpeptidic抗原如脂质或糖脂。 CD1分子的家庭可分为三组:第1组(CD1a,CD1b,CD1c);第二组(CD1d);和组3(CD1e)。 有趣的是,兔子表达所有三组,而老鼠只有表达组2,但不是组1和3。 组1分子主要是提供一个广泛的脂类抗原T细胞无性繁殖系地多元化调解适应性免疫。 相比之下,组2的分子脂类抗原自然杀手T(NKT细胞)。 1 因此,区别中陈述的兔子和老鼠之间nonpeptidic抗原可能解释为什么兔子做出更好的抗体或糖脂脂质比老鼠一般。
初级和二级抗体剧目的发展具有独特的特征。兔子几 2 ,这也可能占的质量产生抗体。 首先,与人类和老鼠,兔子B细胞在淋巴组织发育会内脏相关(高尔特),包括附录。 这就是B细胞囊形式和广泛的B细胞扩张发生在肠道微生物区系的反应nonimmunogen-specific抗体曲目放大,导致
一个更大的天真的抗体库。 主要的高拷贝数曲目是由体细胞多样化的搞笑基因主要是通过基因转换,以及在较小程度上的体细胞高突变率也不能激活)。 基因转换一个独特的免疫球蛋白g基因多样化的机制涉及集群兔子是一个过程从上游基因的核苷酸变化的多样性,增强抗体曲目。
第二,B细胞在兔子高尔特选择通过正面和负面的选择性事件。 细胞的生存选择过程出口外围参与进一步参与外国抗原。 两个基因转换和体高突变率也不能激活)发生在次级淋巴组织如脾脏、淋巴结和集合淋巴结的补丁二级抗体亲和力成熟分化、曲目。 事实上,功能的B细胞滤泡扩张高尔特和基因转换机制多样化提供更大的兔子曲目抗体抗体选择。
第三,兔抗体有点简单的比老鼠和人类抗体。 兔体内没有子类,因为它只有一个Cγ基因,和绝大多数(90 95%)的光链来自Cκ1同形像。 只有5%到10%的总免疫球蛋白轻链是同形像l。这些特征的兔子体内使基因克隆容易得多,比用鼠标或人类免疫球蛋白g。 兔体内有额外的二硫债券的重链可变区;一个额外的二硫键和CκVκ之间也存在在常用b4和b5异型兔子。 这些额外的二硫债券可能导致伟大的稳定和长保质期的兔抗体(图1),它是指出,兔子immunodominance和少显示更少发生当聚合物与重复IgM域如脂类和碳水化合物是immunogens进行免疫接种。 虽然兔子免疫系统通常设置的基础更好的抗体选择,为了发展最合适的抗体为某个特定的应用程序也必须要考虑到质量、结构和免疫原格式;结合的免疫原和运营商,如果必要的;免疫方案;抗体筛查,筛查策略分析。
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