倒平板.细菌培养.分子生物学实验的技巧和注意事项

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时间:2018-07-31 20:29 来源:未知作者:肖遥点击: 次

　　在生物实验中相信大家都经常要倒平板，细菌培养，分子生物学实验等等。医药企业中倒平板更是家常便饭，环境监测、水监测、微生物检查等，初学者往往都倒不好，现在总结几点小技巧供大家参考:

　　一、防止倒皿时的冷凝：

　　1、有经验的都知道，手心不烫手背烫，这是一个经验数据，此时的温度在45度左右，最适合倒平板。

　　2、如果要连续倒多个皿，尤其是在冬天往往容易凝固，一旦凝固则需要再加热到较高温度才能溶化（玻璃体的特性）。所以建议此时有个50度的恒温水浴开着，随时把装培养基的三角瓶放进去效果会好不少。

　　二、培养皿中有冷凝水：

　　一般来说，都会有几滴，影响不大。如果过多则需要注意。大概的情况是：

　　1、倒皿前将平皿最好保持在35-40度的温度（触手有温热感），

　　2、保持平皿静置环境温度高一些。

　　三、倒已冷却的琼脂培养基：

　　对已冷却的培养基再融化颇感头痛心烦，因为放在电炉上烤不仅需要耐心，还得加上小心，一不留神就会冲湿瓶塞；重新放入灭菌锅加热吧，好是好，可又嫌费事。解决方法是用微波炉加热，又快又好，融得彻底，用着放心。当然，装培养基所用的三角瓶得能够放入微波炉才行：250ml.

　　没有微波炉怎么办？用电炉要加小心了，在电炉上直接加热融化营养琼脂时应注意在融化到上面剩最后薄薄的一层时应用小火，缓慢加热，防止气体冲破薄层时导致爆沸，营养琼脂冲出三角瓶。

　　四、倒平皿保持均一性：日水一次性平板图

　　倾注平皿要左三圈，右三圈的晃动，注意不要把平皿盖沾上，并且要轻轻晃动。

　　五、具体对待：

　　前面几点讲了倒平皿的最适温度保持在35-40度，但不同品牌的琼脂质量不一样，同样按照国标中的配方琼脂含量1.5%，有些琼脂凝固很快，有些凝固慢一些，还有环境温度偏低，琼脂凝固也会快一些，要根据实际情况，适当调整琼脂的含量，在室温较低时我们所配的培养基琼脂用量就偏少一些，还有在倒平板和混匀时动作要快一些，室温实在太低，也可以把培养皿放到烘箱中适当加热一下（40度左右）。

　　六、避免气泡：

　　还有同学反映在倒平板时会产生气泡，主要遵守以上各点，加热不要过高，融化即可，加强操作练习，还有就是倒的时候要慢点，最好能够贴着平皿的壁倒下去。

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